Sự kết hợp giữa trimethoprim và sulfamethoxazole có tác dụng hiệp đồng và thường có khả năng diệt khuẩn đối với nhiều loại vi khuẩn Gram dương và Gram âm như E. coli, Haemophilus, Pasteurella, Salmonella, Staphylococcus và Streptococcus spp. Cả hai hợp chất đều ảnh hưởng đến quá trình tổng hợp purine của vi khuẩn theo những cách khác nhau, dẫn đến sự ức chế kép.